IPTG CAS:367-93-1 Valmistajan hinta
Isopropyyli-β-D-1-tiogalaktopyranosidi (IPTG) on laktoosin synteettinen analogi, jota käytetään yleisesti molekyylibiologian tutkimuksessa ja bioteknologian sovelluksissa.IPTG:tä käytetään ensisijaisesti indusoimaan geenien ilmentymistä bakteerijärjestelmissä, joissa se toimii molekyylin laukaisimena kohdegeenien transkription käynnistämiseksi.
Kun IPTG lisätään kasvualustaan, bakteerit ottavat sen vastaan ja voivat sitoutua lac-repressoriproteiiniin estäen sitä estämästä lac-operonin aktiivisuutta.Lac-operoni on klusteri geenejä, jotka osallistuvat laktoosiaineenvaihduntaan, ja kun repressoriproteiini poistetaan, geenit ilmentyvät.
IPTG:tä käytetään usein yhdessä lacUV5-mutanttipromoottorin kanssa, joka on lac-promoottorin konstitutiivisesti aktiivinen versio.Yhdistämällä IPTG-induktion tähän mutanttipromoottoriin tutkijat voivat saavuttaa korkean geenin ilmentymisen.Tämä mahdollistaa suurten proteiinimäärien tuotannon puhdistusta tai muita myöhempiä sovelluksia varten.
Geeniekspression lisäksi IPTG:tä käytetään usein myös sinivalkoisissa seulontamäärityksissä.Tässä tekniikassa lacZ-geeni fuusioidaan tyypillisesti kiinnostavaan geeniin, ja tätä fuusiogeeniä onnistuneesti ilmentävät bakteerit tuottavat aktiivisen p-galaktosidaasientsyymin.Kun IPTG:tä lisätään kromogeenisen substraatin, kuten X-gal:n, kanssa, fuusiogeeniä ilmentävät bakteerit muuttuvat siniseksi β-galaktosidaasin aktiivisuuden vuoksi.Tämä mahdollistaa sellaisten rekombinanttikantojen tunnistamisen ja valinnan, jotka ovat onnistuneesti integroineet kiinnostavan geenin.
Geeniekspression induktio: IPTG:tä käytetään yleisesti kohdegeenien ilmentymisen indusoimiseen bakteerijärjestelmissä.Se jäljittelee luonnollista indusoijaa laktoosia ja sitoutuu lac-repressoriproteiiniin estäen sitä estämästä lac-operonia.Tämä mahdollistaa haluttujen geenien transkription ja ekspression.
Proteiinin ilmentäminen ja puhdistus: IPTG-induktiota käytetään usein tuottamaan suuria määriä rekombinanttiproteiineja eri tarkoituksiin, kuten biokemiallisiin tutkimuksiin, terapeuttiseen tuotantoon tai rakenneanalyysiin.Käyttämällä asianmukaisia ekspressiovektoreita ja IPTG-induktiota tutkijat voivat saavuttaa korkean kohdeproteiinin tuotannon bakteeri-isännissä.
Sinivalkoinen seulonta: IPTG:tä käytetään usein yhdessä lacZ-geenin ja kromogeenisen substraatin, kuten X-gal:n, kanssa sinivalkoisiin seulontamäärityksiin.LacZ-geeni fuusioidaan tyypillisesti kiinnostavaan geeniin, ja tätä fuusiogeeniä onnistuneesti ilmentävät bakteerit tuottavat aktiivisen p-galaktosidaasientsyymin.Kun IPTG ja kromogeeninen substraatti lisätään, fuusiogeeniä ilmentävät rekombinanttikannat muuttuvat sinisiksi, mikä mahdollistaa helpon tunnistamisen ja valinnan.
Geenisäätelyn tutkimus: IPTG-induktiota käytetään yleisesti tutkimuksessa geenien ja operonien, erityisesti lac-operonin, säätelyn tutkimiseen.Manipuloimalla IPTG:n pitoisuuksia ja seuraamalla lac-operonikomponenttien ilmentymistä tutkijat voivat tutkia geenisäätelyn mekanismeja ja eri tekijöiden tai mutaatioiden roolia.
Geeniekspressiojärjestelmät: IPTG on ratkaiseva komponentti useissa geeniekspressiojärjestelmissä, kuten T7-promoottoripohjaisissa järjestelmissä.Näissä systeemeissä lac-promoottoria käytetään usein ohjaamaan T7-RNA-polymeraasin ilmentymistä, joka puolestaan transkriptoi kohdegeenejä T7-promoottorisekvenssien ohjauksessa.IPTG:tä käytetään indusoimaan T7-RNA-polymeraasin ilmentyminen, mikä johtaa kohdegeenin ilmentymisen aktivoitumiseen.
| Sävellys | C9H18O5S |
| Määritys | 99 % |
| Ulkomuoto | valkoinen jauhe |
| CAS-nro | 367-93-1 |
| Pakkaus | Pieni ja iso |
| Säilyvyys | 2 vuotta |
| Varastointi | Varastoi viileässä ja kuivassa paikassa |
| Sertifiointi | ISO. |
