Fenyyligalaktosidi CAS:2818-58-8

Vaikutus entsyymiaktiivisuuteen: Fenyyligalaktosidia käytetään yleisesti β-galaktosidaasientsyymin aktiivisuuden mittaamiseen.Kun fenyyligalaktosidi hydrolysoituu β-galaktosidaasilla, se vapauttaa p-nitrofenolia.P-nitrofenolin kertymistä voidaan mitata kvantitatiivisesti, mikä antaa käsityksen β-galaktosidaasin aktiivisuudesta.Tätä vaikutusta hyödynnetään sovelluksissa, kuten entsyymimäärityksissä ja seulontajärjestelmissä.

Geeniekspressioanalyysi: Fenyyligalaktosidia käytetään usein substraattina molekyylibiologian kokeissa geenin ilmentymisen tutkimiseksi.LacZ-geeni, joka koodaa p-galaktosidaasia, on tavallisesti fuusioitu muiden mielenkiinnon kohteena olevien geenien säätelysekvenssien kanssa.LacZ-geenin ilmentyminen ja fenyyligalaktosidin hydrolyysi p-galaktosidaasin vaikutuksesta voivat osoittaa tutkittavan kohdegeenin ilmentymismallin ja tason.

Seulontajärjestelmät: Fenyyligalaktosidi on tärkeä komponentti seulontajärjestelmissä, jotka hyödyntävät β-galaktosidaasiaktiivisuutta.Eräs laajalti tunnettu esimerkki on sinivalkoinen seulontamenetelmä, jota käytetään rekombinanttien tai transformoituneiden solujen tunnistamiseen molekyylibiologisissa kokeissa.Pesäkkeet, jotka ovat onnistuneesti ottaneet vastaan ​​yhdistelmä-DNA:n tai läpikäyneet geneettisen rekombinaation, ilmentävät β-galaktosidaasia, mikä johtaa fenyyligalaktosidin hydrolyysiin ja sinisen värin muodostumiseen.

Proteiinin puhdistus: Joissakin tapauksissa fenyyligalaktosidia voidaan käyttää ligandina affiniteettikromatografiassa sellaisten proteiinien puhdistamiseksi, jotka sitoutuvat spesifisesti β-galaktosidaasiin tai ovat sen aktivoimia.Kiinnostuksen kohteena olevalla proteiinilla voi olla affiniteettimerkki tai fuusiomerkki, joka sisältää p-galaktosidaasia sitovan domeenin.Ohjaamalla proteiiniseos pylvään läpi, jossa on immobilisoitua fenyyligalaktosidia, haluttu proteiini voidaan säilyttää selektiivisesti ja sen jälkeen eluoida.