5-bromi-4-kloori-3-indolyyli-beeta-D-glukuronidisykloheksyyliammoniumsuola CAS: 18656-96-7

5-bromi-4-kloori-3-indolyyli-beeta-D-glukuronidisykloheksyyliammoniumsuolan (X-glukuronidi) vaikutus perustuu sen kykyyn tuottaa sininen sakka tai värinmuutos beeta-D-glukuronidaasientsyymin läsnä ollessa. Tämä entsymaattinen reaktio tapahtuu, kun beeta-D-glukuronidaasi pilkkoo indoliryhmän ja glukuronihappo-osan välisen glykosidisidoksen.

X-glukuronidia käytetään pääasiassa molekyylibiologian ja entsymologian kokeissa. Sitä käytetään yleisesti substraattina beeta-D-glukuronidaasin aktiivisuuden havaitsemiseksi. Joitakin erityisiä sovelluksia ovat:

Reportterigeenimääritykset: X-glukuronidia käytetään usein substraattina reportterigeenimäärityksissä, joissa beeta-D-glukuronidaasia käytetään reportterientsyyminä. Fuusioimalla kiinnostuksen kohteena olevan geenin promoottorialueen tai koodaavan sekvenssin beeta-D-glukuronidaasigeeniin tutkijat voivat mitata geenin ilmentymistä tai aktiivisuutta seuraamalla sinisen sakkauman muodostumista tai värinmuutosta, kun X-glukuronidia lisätään.

Bakteerien ja hiivojen transformaatiomääritykset: X-glukuronidia voidaan käyttää havaitsemaan bakteerien tai hiivojen onnistunut transformaatio vektorilla, joka sisältää beeta-D-glukuronidaasigeenin. Entsyymiä ilmentävät transformoidut solut voivat hydrolysoida X-glukuronidia, jolloin muodostuu näkyvä värinmuutos tai sakka.

Histokemiallinen värjäys: X-glukuronidia käytetään histokemiallisissa värjäystekniikoissa beeta-D-glukuronidaasiaktiivisuuden läsnäolon ja jakautumisen visualisoimiseksi kudoksissa tai soluissa. Tämä värjäys mahdollistaa entsyymiä ilmentävien solujen paikantamisen ja tunnistamisen.