Nitrotetratsolium sininen kloridi CAS: 298-83-9

Nitrotetratsoliumsinikloridi (NBT) on redox-indikaattori, jota käytetään yleisesti biologisissa ja biokemiallisissa määrityksissä. Se on vaaleankeltainen jauhe, joka muuttuu siniseksi pelkistyessään, mikä tekee siitä hyödyllisen tiettyjen entsyymien ja aineenvaihdunnan aktiivisuuden havaitsemisessa.

NBT:n ensisijainen vaikutus on sinisen formazaanisaostuman muodostuminen, kun tietyt entsyymit pelkistävät sitä. Tämä värinmuutos mahdollistaa entsyymiaktiivisuuden visuaalisen tai spektrofotometrisen havaitsemisen.

NBT:llä on useita sovelluksia tutkimuksessa ja diagnostiikassa. Tässä on joitakin sen tärkeimmistä käyttötarkoituksista:

Entsyymiaktiivisuusmääritykset: NBT:tä voidaan käyttää dehydrogenaasien aktiivisuuden mittaamiseen, jotka osallistuvat prosesseihin, kuten soluhengitykseen ja aineenvaihduntaan. Seuraamalla NBT:n pelkistymistä formazaaniksi tutkijat voivat arvioida näiden entsyymien aktiivisuutta.

Immuunisolujen toiminnan arviointi: NBT:tä käytetään yleisesti NBT-pelkistystestissä arvioimaan immuunisolujen, erityisesti fagosyyttien, hengityspurkausaktiivisuutta. Testi mittaa näiden solujen kykyä tuottaa reaktiivisia happilajeja, jotka voivat pelkistää NBT:tä ja muodostaa sinisen sakkauman.

Mikrobiologian tutkimus: NBT:tä käytetään mikrobiologiassa mikrobien aineenvaihdunnan tutkimiseen ja tiettyjen entsyymien aktiivisuuden arviointiin. Sitä on käytetty esimerkiksi bakteerien nitraattireduktaasien tai formazaania muodostavien bakteerien havaitsemiseen.

Solujen elinkykytutkimukset: NBT-pelkistys antaa tutkijoille mahdollisuuden arvioida solujen aineenvaihdunnallista aktiivisuutta ja elinkykyä. Sinisen formazaanituotteen intensiteetin kvantifioimalla on mahdollista määrittää elinkelpoisten solujen lukumäärä tietyssä näytteessä.