ONPG CAS:369-07-3 Valmistajan hinta

Substraattina ONPG pilkkoutuu β-galaktosidaasientsyymin avulla, jolloin vapautuu keltainen tuote, o-nitrofenoli. Tämä värinmuutos voidaan mitata spektrofotometrisesti, mikä mahdollistaa β-galaktosidaasiaktiivisuuden kvantifioinnin. ONPG:n käyttökohde on ensisijaisesti geenien ilmentymisen arviointi molekyylibiologian ja mikrobiologian tutkimuksessa. Sitä käytetään yleisesti β-galaktosidaasiaktiivisuuden mittaamiseen reportterina geenien ilmentymistutkimuksissa, erityisesti bakteereissa, kuten E. colissa. β-galaktosidaasia koodaavaa lacZ-geeniä käytetään usein markkerina geenien ilmentymisanalyysissä, koska sen ilmentymistä voidaan indusoida tietyillä olosuhteilla tai kontrolloida tietyillä promoottoreilla. ONPG-määritys tarjoaa kätevän ja luotettavan menetelmän geenien ilmentymisen tason arvioimiseksi mittaamalla β-galaktosidaasin aktiivisuutta. Tätä määritystä käytetään laajalti erilaisissa sovelluksissa, kuten promoottoriaktiivisuuden, geenisäätelyn ja proteiini-proteiini-vuorovaikutusten tutkimisessa. Lisäksi sitä voidaan käyttää entsyymikinetiikan määrittämiseen ja mutaatioiden tai hoitojen vaikutusten arviointiin entsyymiaktiivisuuteen.